細胞給藥怎么給？
藥物濃度的精確控制對于實驗的成功至關重要。正確的細胞給藥不僅能夠確保實驗模型的準確性，還能有效評估藥物的效果。
精確計算藥物濃度
在準備藥物溶液時，需要特別注意以下幾點：
1. 確保藥物純度：使用高質量的藥物，并用精密儀器準確稱量。
2. 選擇合適的溶劑：例如，DMSO是一種常用的溶劑，但必須稀釋至1000倍以下，以避免對細胞產生毒性。
3. 促進藥物溶解：通過攪拌、振蕩或超聲等方法確保藥物充分溶解。
4. 稀釋至所需濃度：根據實驗需求，將藥物溶液稀釋至所需濃度，并進行過濾以去除可能的微生物污染。
5. 儲存條件：根據藥物的穩定性要求，將其儲存在適宜的條件下，并在必要時檢測藥物濃度，確保其準確性。
如何給藥：
細胞給藥通常按照以下公式進行計算：
細胞內藥物濃度=給藥濃度×細胞攝入率×細胞量/細胞體積
具體步驟
1. 藥物配制：
固體藥物配制：藥物質量(mg)=要達到的濃度(mM)×溶劑體積(L)×藥物的分子量
液體藥物配制：起始濃度=最終濃度×最終體積
2. 設置合適的給藥濃度：
查閱相關文獻，明確給藥濃度。
設置劑量梯度進行預實驗，通過兩次預實驗篩選出合適的藥物濃度。
3. 向培養細胞板內加入不同濃度藥物：
懸浮細胞先離心，貼壁細胞可直接吸走舊的培養基。
貼壁細胞需用PBS溶液進行清洗，蓋板后呈“8”字晃動，吸走PBS。
純白組無細胞，只加入培養基；對照組有細胞，加培養基不加藥；剩余8孔按照實驗設計加入不同濃度的藥物及培養基。
藥物配制過程中，還需嚴格遵循無菌操作規程，確保實驗的準確性。同時，要注意藥物的溶解性和穩定性，選擇恰當的溶劑和儲存條件。所有操作都應按照實驗設計的要求嚴格執行。
