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薄層層析法的起源及發(fā)展三個階段
發(fā)布日期:2023-01-31 08:49:41


薄層層析法的起源及發(fā)展三個階段


  • 薄層層析(TLC)技術(shù)

薄層色譜技術(shù)又稱為薄層層析 法,是20世紀50年代從經(jīng)典柱色譜法及紙色譜法的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種平面色譜技術(shù);至20世紀60年代后,人們對薄層色譜法在使用器材的規(guī)格、操作方法及術(shù)語使用的標準化等方面進行了大量的工作,使該方法日趨成熟和完善,廣泛地應(yīng)用于中藥及其制劑中各類化學物質(zhì)的定性與定量分析。近20年來,人們對薄層色譜法在縮短分離時間、提高分離效率、提高檢測靈敏度、保證定量精度及擴大應(yīng)用范圍等方面不斷進行研究,取得很大進展。近幾年發(fā)展起來的現(xiàn)代薄層色譜借助于高科技與計算機技術(shù)已發(fā)展到儀器化、自動化、計算機化和與其他色譜技術(shù)聯(lián)機化的階段,可以說是目前眾多色譜技術(shù)中應(yīng)用最廣、發(fā)展最快的一種分離技術(shù)。總結(jié)薄層色譜技術(shù)產(chǎn)生和發(fā)展的過程,可以將其分為以下3個階段。

1.起步階段

薄層色譜法的起源可以追溯到19世紀末,當時,有人曾用明膠薄層分離鹽酸和硫酸,也有人分離酶。其后于1938年由N.A.Izmailor和M.S.Schraiber首次使用在顯微鏡載玻片上涂布的氧化鋁薄層用微量圓環(huán)技術(shù)分離了多種植物 酊劑中的成分,這是目前認為最早的薄層色譜法。以后有少數(shù)幾篇類似的報道,有的用吸附劑板,有的用浸漬有吸附劑的紙,但進展不大。至1949年J.E.Meinhard和N.F.Hall報道了以淀粉為黏合劑的氧化鋁和硅藻土板進行無機離子的分離,啟發(fā)了J.G.Kirchner等人使用硅膠為吸附劑,煅石膏為黏合劑,制成較牢固的薄層板,并用類似于紙色譜的上行展開方式,進行了揮發(fā)油成分的分離。在此法中可以進行雙向展開,也可用顯色劑顯示無色組分的斑點,這種方式將柱色譜與紙色譜的優(yōu)點結(jié)合在一起,奠定了薄層色譜的基礎(chǔ)。1951~1954年發(fā)表了一些研究報告,此時Kirchner將其稱之為“色譜條”(chromatostrip),R.H.Reitsema則將其稱之為“色譜板”(chromato—plate)。經(jīng)過了近半個世紀的摸索,現(xiàn)已初步形成了用薄層色譜板進行成分分析的薄層色譜法。

2.推廣普及階段

20世紀50年代薄層色譜法已初具規(guī)模,但此法得到普遍承認和使用則還是1956~1958年以后的事。在此期間,E.Stahl進行了較系統(tǒng)的研究,在吸附劑硅膠的規(guī)格、性能、薄層厚度等對于分離的影響籌方面得到了總結(jié)性的結(jié)論,而生產(chǎn)廠家聯(lián)邦德國的Desage和Merck也開始供應(yīng)薄層分離用的硅膠和涂布薄層的涂布器及其他有關(guān)設(shè)備,使分離結(jié)果的重現(xiàn)性得到較好的保證。尤其是在Stahl的《薄層色譜手冊》一書于1965年出版后,薄層色譜技術(shù)得以宣傳介紹,從此被廣泛使用,并正式采用了薄層色譜法的名稱,由歐洲向世界各地推廣,應(yīng)用方法日趨成熟和完善。此時,我國的醫(yī)藥學界也開始推廣使用薄層色譜法,并利用該項技術(shù)對中藥中各類化學物質(zhì)進行定性與定量分析。

3.發(fā)展提高階段

20世紀80年代以前,色譜法開始是以一種分離方法出現(xiàn)的。復雜的混合物通過裝有吸附劑的柱管可以被分離成一條條的色帶,從而可以取下、溶出、獲得純的組分。其后經(jīng)過近幾十年的發(fā)展,薄層色譜法逐漸成熟,進而成為一門專門學科。它集分離、分析于一體,簡便、快速、微量,成為分離分析復雜混合物的理想方法之一,在許多科學領(lǐng)域中得到廣泛應(yīng)用。例如,各國藥典收載的天然藥物及其制劑采用薄層色譜鑒別的品種超過50%的即有德國、法國、英國、瑞士及歐洲藥典等。《中華人民共和國藥典》(以下簡稱《中國藥典》)1990年版開始采用薄層色譜法進行鑒別的品種數(shù)目逐版大幅度增加。薄層色譜法在國家標準中及新藥研制中的大量應(yīng)用,充分證實了該方法對于鑒別成分復雜的中藥是簡便有效的手段,它解決了許多其他分離分析方法所不能解決的難題,有力地推動了中藥鑒別水平的發(fā)展和提高,同時因為該項技術(shù)在其他領(lǐng)域的廣泛使用,也有力地推動了醫(yī)藥、衛(wèi)生、生化、天然有機化學等其他學科的發(fā)展和提高,在科學技術(shù)進步的歷程中,起到了較大的推動和促進作用。特別是近年來借助于高科技與計算機技術(shù)的介入,薄層色譜技術(shù)已在原有基礎(chǔ)上進人了儀器化、自動化、計算機化和與其他色譜技術(shù)聯(lián)機化的快速發(fā)展和提高階段。隨著薄層色譜技術(shù)的不斷完善,在今后的中藥分析的研究工作中,將具有更為廣闊的應(yīng)用前景,將會做出更大的貢獻。



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