重組蛋白發(fā)酵：誘導(dǎo)之后，菌體最脆弱的時候

重組蛋白發(fā)酵中，加入誘導(dǎo)劑后菌體把大量能量用于表達(dá)外源蛋白，自身防御能力下降。這時候的染菌風(fēng)險比對數(shù)生長期高得多。

誘導(dǎo)后為什么更容易染菌？

重組蛋白在表達(dá)過程中會耗用大量宿主細(xì)胞資源，對細(xì)胞造成代謝負(fù)荷，使細(xì)胞的生理產(chǎn)生很大變化，甚至損害細(xì)胞正常的代謝功能。菌體處于應(yīng)激狀態(tài)，對外界雜菌的抵抗能力下降。

誘導(dǎo)后通常伴隨降溫（從37℃降到25-30℃），低溫下菌體生長放緩，某些雜菌反而更活躍。補(bǔ)料系統(tǒng)在誘導(dǎo)階段持續(xù)運(yùn)行，補(bǔ)料管路一旦有微滲漏，雜菌就隨著補(bǔ)料液進(jìn)入發(fā)酵罐。

誘導(dǎo)后染菌的典型表現(xiàn)

加入誘導(dǎo)劑后OD不升反降。溶氧異常回升。pH波動異常。目標(biāo)蛋白表達(dá)量遠(yuǎn)低于預(yù)期。

防控要點(diǎn)

誘導(dǎo)前確保發(fā)酵體系絕對無菌。誘導(dǎo)劑的配制和滅菌要單獨(dú)驗證。補(bǔ)料系統(tǒng)在誘導(dǎo)階段要更頻繁地監(jiān)測。誘導(dǎo)后的降溫過程要控制罐壓，防止負(fù)壓倒吸。

誘導(dǎo)之后，菌體在全力產(chǎn)蛋白，沒精力對付雜菌。你的無菌防線要比平時更嚴(yán)密。

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