巴西諾卡菌染色
弱抗酸染色步驟和原理:
弱抗酸染色法:是用于檢測分枝桿菌屬,諾卡菌屬,隱球菌屬等微生物的實驗室技術(shù),其原理基于細菌細胞壁中的分枝菌酸或其他脂質(zhì)成分對染料的保留能力差異。
染色步驟包括:初染(石炭酸復(fù)紅加熱),脫色(弱酸性脫色劑)和復(fù)染(亞甲藍),最終弱抗酸菌呈紅色,非抗酸菌呈藍色。
弱抗酸染色步驟:(30s最佳脫色時間)
1.樣本制備與固定:取待檢樣本(如痰液,組織切片等)均勻涂布于載玻片上,自然干燥后通過火焰或甲醇固定,避免細胞結(jié)構(gòu)破壞。
2.初染(石炭酸復(fù)紅染色):滴加石炭酸復(fù)紅染液覆蓋樣本,加熱至輕微蒸氣(約5-8分鐘),使染料充分滲透細胞壁。加熱可增強染料與分枝菌酸的結(jié)合。
3.脫色(弱酸性酒精處理):用1%鹽酸酒精(或弱酸性脫色劑)沖洗玻片10-30秒,脫去非抗酸菌表面的染料。弱抗酸菌因含少量分枝菌酸,僅部分脫色,保留淡紅色;非抗酸菌完全脫色。
4.復(fù)染(亞甲藍對比染色):滴加亞甲藍染液復(fù)染1分鐘,水洗后干燥。非亢酸菌被染成藍色,與弱抗酸菌形成鮮明對比。


